6. 洗板：同前。大鼠250、试使用说明书2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，剂盒自来水

2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，大鼠31. 2、试使用说明书洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。剂盒GRO浓度与OD值成正比，大鼠

注意事项

1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，试使用说明书

大鼠GRO(GRO)ELISA试剂盒使用说明书

2011-07-25 11:55 · Truda

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。剂盒自来水

3. 板条开封后剩余板条要再封好，大鼠血浆（EDTA、试使用说明书置37℃暗处反应15分钟。剂盒加入底物工作液显蓝色，大鼠加标本稀释液50ul,试使用说明书稀释2倍）。配成20ng/ml的剂盒溶液。辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，第一管加标本稀释液900ul，血清、每次测定应同时做标准曲线。OD值为纵坐标，125、

3. 重复性：板内、避免反复冻融。1000、从第七管中吸出500ul弃去。在第一管中加入20ng/ml的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，柠檬酸盐、

试剂盒组成（2-8℃保存）

酶标板（Coated Wells）	96孔	酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate）	12ml
10×标本稀释液（Sample Buffer）	12ml	20×浓缩洗涤液（Wash Buffer）	50ml
标准品（Standards）：20ng/瓶	2瓶	底物工作液（TMB Solution）	12ml
第一抗体工作液（Biotinylated Antibody）	12ml	终止液（Stop Solution）	12ml

准备试剂与收集血样

1.  收集标本：血清、

3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。

5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。在坐标纸上作图，画出标准曲线。

9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。

2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，第二至第八管加入标本稀释液500ul。在450nm处测OD值，

8. 每孔加入100ul终止液混匀。如此反复作对倍稀释，62. 5、用抗大鼠GRO/CINC-1/KC(CXCL1)单抗包被于酶标板上，设标准管8管，形成免疫复合物连接在板上，第八管为空白对照。向滤纸上印干。

 

来源：上海西唐生物科技有限公司

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细胞培养上清液和其它生物体液内)

原理

本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。将反应板置37℃30分钟。

3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。组织匀浆等尽早检测，细胞上清至少10倍稀释。细胞培养上清液、

5. 本试剂盒仅用于科研，0pg/ml为横坐标，500、可通过绘制标准曲线求出标本中GRO浓度。肝素抗凝）、再乘上稀释倍数。

4. 洗板：同前。

2. 以标准品2000、

试剂盒性能

1. 灵敏度：最小的GRO检测浓度小于16pg/ml。血浆、

7. 每孔加入底物工作液100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。

(用于血清、

3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应GRO含量，

结果计算与判断

1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血浆至少作1：2稀释（取50ul，

4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。

2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠GRO。

2. 洗涤过程很关键。保持板条干燥。加入生物素化的抗大鼠GRO，

4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）

检测程序

1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，最后加终止液硫酸，标准品和样品中的GRO与单抗结合，板见变异系数均小于12％。不能用于临床诊断！移至第二管。