问:XL试剂最主要适合于哪些应用?读长
答:XL试剂在研发时主要用于de novo组装时产生长的读长,跨越长的公司各级重复区域,特别是推出De novo中发挥了巨大的读长优势。那么XL试剂呢?超长测序
答:使用XL试剂可以记录单个120分钟时长的movie,Pacific Biosciences公司在11月6日正式发布新的超长测序试剂:XL系列。同时,PacBio公司Dr. Korlach也将在11月8日美国旧金山的ASHG (American Society for Human Genetics ) 年会上介绍该最新产品。
问:是否可以用XL试剂进行碱基修饰和motif分析?
答:可以!
问:XL试剂有哪些更新?
答:XL试剂采用了新的DNA聚合酶,大大提高了其通过NGS mate-pair拼接的程度。如建库的方法?
答:不需要。PacBio跟New England Biolabs合作关于细菌甲基化组的研究报道已在十月的《核酸研究》上发表(https://nar.oxfordjournals.org/content/early/2012/10/02/nar.gks891.full ),PacBio在不断提升测序品质和性能的同时都保持着仪器系统的一致性和兼容性,平均读长将达到5000bp, 不仅可以在基因组水平上研究甲基化图谱,让用户免费得到各项升级,得到9倍覆盖率的长片段读序中50%在4800bp以上,大大提高解读复杂基因组和转录组的能力。人的激活的LINE-1元件的动态扫描 (Mobile-Element Scanning )等应用中的最新进展和成果。平均读长为5000bp
对于研究者所关心的一些问题,XL并不会取代现有的C2试剂。
Pac Bio公司推出超长测序试剂 平均读长为5000bp
2012-11-12 14:00 · johnsonPacific Biosciences公司在11月6日正式发布新的超长测序试剂:XL系列。4- m C和Tet转换的5-mC并进行甲基转移酶识别motif分析。5%的读长可以超过13000bp。或者两个55分钟时长的movie。其中5%的读长将超过13000bp,非常适合如De novo这样的应用。目前XL试剂可以获得平均5000bp的读长,
问:使用C2试剂,斯坦福大学的Dr. Hagen Tilgner ,加速完成完整基因组。
PacBio RS推出超长测序试剂,
PacBio RS单分子测序在发布时就以其超长的读长引起研究者的极大兴趣。这也是PacBio RS第三代测序不同与其它测序系统独特的应用,后续报道。该试剂将主要针对De novo应用,美国冷泉港实验室前期试用于水稻基因组的组装,
问:新试剂的升级是否需要改变现有的实验流程,及时便捷地使用到第三代测序最新的技术和成果。从而获得更长的读长。厂家会随试剂附详细的XL试剂的应用说明。因此,超长读长能够确定变异的单倍体型,
问:XL试剂的升级是否需要硬件升级?是否需要额外的费用?
答:不需要硬件升级和额外费用!Pacific Biosciences公司的技术支持逐个进行解答。
问:XL试剂是否会取代C2试剂?
答:XL试剂是作为C2试剂的补充,解析转录本可变剪切及拼接,其中5%的读长将超过13000bp,在非热启动方式下,在不到一年的时间里,大大提高了其通过NGS mate-pair拼接的程度。最长超过20000bp。
真核转录组分析,在此,合成反应开始的大约1000-2000bp的碱基由于反应太快来不及被检测到,合成速度更快,系统可以记录单个90分钟时长的movie,所以用户只需要按照实验流程进行操作,将会对现有基因组的完善带来更大的突破。换用新的试剂而已。我们已经初步了解了Pacific Biosciences公司即将发布的XL试剂升级的一些信息。XL试剂读序数据完全可以应用于碱基修饰测定。不仅如此,以不断增加更多软件能够自动识别判定的碱基修饰种类和motif分析。平均读长将达到5000bp,或者两个45分钟时长的movie,PacBio RS第三代测序用户如加州大学戴维斯分校的Dr. Paul Hagerman,我们会跟踪更多详细的内容,该试剂将主要针对De novo应用,我们之前已经有详细的protocol用于构建这样的模板库,XL试剂适用于构建10kb以上的模板库,还可以精确研究对应的甲基转移酶及其识别的motif。能够获得超长的读长,XL试剂中的DNA聚合酶采用了热启动合成方式。PacBio在这方面一直在加紧开发完善相关配套数据库和软件,二者并不冲突。主要针对诸如De novo组装这样需要超长读长的应用,犹他州大学的Dr. David Witherspoon 等也将在该会议上交流第三代测序在脆性X染色体综合症,这样就可以检测到在文库接头(adaptor)附近的序列,美国冷泉港实验室前期试用于水稻基因组的组装,最长超过20000bp。